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ELISA試劑盒抗原抗體反響后直接測(cè)定形成的沉積或濁度,敏感度可達(dá) 5~10μg/ml,但在查驗(yàn)中,某些待測(cè)物在標(biāo)本中的含量遠(yuǎn)低于這一水平,因而要尋覓添加敏感度的辦法。符號(hào)的免疫測(cè)定是 將檢測(cè)試劑中的抗原或抗體用可微量測(cè)定的物質(zhì)加以符號(hào),經(jīng)過(guò)測(cè)定符號(hào)物來(lái)進(jìn)步敏感度。在放射免疫測(cè)定和酶免疫測(cè)定中,符號(hào)物別離 為放射性核素和酶,zui后用測(cè)定放射性和酶生機(jī)來(lái)核算待檢物的量,敏感度可比直接測(cè)定沉積物進(jìn)步數(shù)百至數(shù)千倍。在符號(hào)免疫測(cè)定中, 一般參加過(guò)量的符號(hào)試劑以確保與待測(cè)物*反響。
ELISA試劑盒以符號(hào)抗體(Ab ※)檢測(cè)抗原(Ag)為例,反響式如下: Ag+ Ab※→ AgAb>※+ Ab※在反響產(chǎn)物中有與Ag結(jié)合的Ab※和游離和Ab※ ,如不將兩者分離而測(cè)定符號(hào)物,測(cè)得的成果將為兩者之和。因而,游離符號(hào)物與結(jié)合符號(hào)物的分離是符號(hào)免疫測(cè)定中的重要過(guò)程。可采 用多種手段,固相載體是其中之一。如將抗原或抗體包被在固相載體上,ELISA試劑盒然后再與符號(hào)的抗原或抗體直接反響,結(jié)合的符號(hào)物被固定在載 體上,而游離的符號(hào)物留于溶液中。這樣能夠經(jīng)過(guò)洗刷將游離的Ab ※除掉,結(jié)合符號(hào)物的測(cè)定可在固相上進(jìn)行。