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一、直接法
將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。
1. 優(yōu)勢:操作手續(xù)簡略,因無須運用二抗可防止交互反響。
2. 缺陷:實驗中的一抗都得用酶符號,但不是每種抗體都適合做符號,費用相對進步。
二、間接法
此測定辦法與直接法相似,不一樣在于一級抗體沒有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
1. 優(yōu)勢:二抗能夠加強信號,并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它zui多的免疫反響性。
2. 缺陷:交互反響發(fā)作的機率較高。
三、雙抗體夾心法
被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其間一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體,此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量;或不符號,再透過酶符的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體有必要當心選擇,才可防止交互反響或競爭一樣的抗原部位。
1. 優(yōu)勢:高活絡、高專一性,抗原無須事前純化。
2. 缺陷:抗原必定得具有兩個以上的抗體部位。
四、競爭法
樣本里的抗原(自在抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一同競爭一樣的抗體,當樣品里的自在抗原越多,就能夠越多的抗體,而固定抗原就只能到較少的抗體,反之亦然。經(jīng)清潔過程,洗去自在抗原和抗體的復合物,只留下固定抗原和抗體的復合物,拿來與只要固定抗原的對照組成果相比擬,依據(jù)呈色區(qū)別就可計算出樣品里的抗原含量。
1. 優(yōu)勢:可適用比擬不純的樣本,并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
2. 缺陷:全體的敏感性和專一性都較差。
五、根據(jù)細胞法(ELISA技術(shù))
是一種新的定性蛋白檢測技術(shù),將細胞直接在微孔板里培育,待檢測時,不需抽提蛋白和裂解細胞,便可直接丈量微孔板里蛋白經(jīng)影響或抑制作用后的改變。
1. 優(yōu)勢:無需裂解細胞,所以方針蛋白丟失zui少,可測定完好細胞、黏附細胞、還有非粘附細胞。
2. 缺陷:不能測定抗原量。
上海研域生物企業(yè)信條即企業(yè)所信奉的人格行為準則,ELISA試劑盒是企業(yè)倫理道德的集中體現(xiàn),我們公司對于有經(jīng)驗和有條件的客戶,我們提供專人指導。我司員工將智慧回饋企業(yè)和社會,幫助員工設計事業(yè)發(fā)展的軌跡,為他們提供機會,幫助他們成功,應鼓勵開放的心態(tài),鼓勵經(jīng)驗、知識交流共享,讓每個員工在強智得到價值提升。