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不論是正常發(fā)育還是疾病發(fā)展,細胞凋亡(或稱為程序性細胞死亡)都是一個重要的過程,因此它也受到了研究者們的廣泛關注。DNA段化是細胞凋亡的一個顯著標志,而ELISA試劑盒分析是檢測DNA段化的一個常用技術。
ELISA分析的全名是脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)介導的缺口末端標記法,其原理是染色體DNA斷裂時會產生大量的粘性3'-OH末端,生物素或熒光素標記的dUTP可在TdT的作用下?lián)饺氲紻NA的3'-末端,隨后被顯色系統(tǒng)檢測出來。
ELISA試劑盒分析的檢測方法取決于分子標簽的特性。舉例來說,對于標記有綠色或紅色熒光分子的DNA來說,需要用到熒光計、顯微鏡或其他熒光檢測設備。如果對象是懸浮細胞,還可以使用流式細胞儀。對于生物素標記的DNA而言,可通過鏈酶親和素-辣根過氧化酶進行檢測,這一系統(tǒng)產生的顯色或發(fā)光信號需要用到光度計。
ELISA試劑盒EMD Millipore的TUNEL分析產品包括:可用于石蠟包埋組織、冰凍組織切片、細胞懸液和貼壁細胞的ApopTag® ISOL雙熒光凋亡檢測試劑盒;對懸浮細胞進行流式分析的Apo-Direct TUNEL分析試劑盒;以及ApopTag過氧化物酶原位凋亡檢測試劑盒。